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O reagente de Ehrlich é um reagente que contém p-dimetilaminobenzaldeído (DMAB), que pode ser usado em testes bioquímicos para a detecção do aminoácido triptofano em uma amostra de proteína.
O nome do teste desse reagente é uma homenagem ao ganhador do Prêmio Nobel Paul Ehrlich, que usou esse reagente para identificar e distinguir febre tifoide e diarreia simples.
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| Foto de Paul Ehrlich |
O teste de Ehrlich, também conhecido como teste de aldeído de Ehrlich, tem sido usado em laboratórios para exames médicos, alguns para testes de drogas, enquanto outros para o diagnóstico de várias doenças.
Esse teste fornece um diagnóstico de doenças hepáticas, síndrome carcinoide, processos hemolíticos e oclusão do ducto biliar comum. Uma das formas comuns do teste de Ehrlich é o teste local usado para a detectar a presença de compostos psicoativos como triptaminas (como DMT) e ergolóides (como LSD).
Um teste de Ehrlich positivo é obtido para o ópio natural, pois contém triptofano. O reagente de Ehrlich também é usado para a identificação de indóis e urobilinogênio (encontrados na urina).
A presença de urobilinogênio em alta concentração na amostra de urina auxilia no diagnóstico de icterícia hepática e hepatite.
Princípio do Teste de Ehrlich
O reagente de Ehrlich consiste em p-dimetilaminobenzaldeído. A reação que ocorre no teste é baseada no princípio de que sob condições ácidas, o reagente de Ehrlich sofre substituição eletrofílica.
A substituição ocorre no indol ou no anel benzil pirrol do triptofano para produzir um produto de condensação azul-violeta. O produto de condensação formado após a reação é ainda melhorado pela adição de NaNO2.
O reagente de Ehrlich também é usado para detectar urobilinogênio na urina. O urobilinogênio é um dos pigmentos biliares encontrados na urina em caso de defeitos hepáticos (icterícia epidêmica e cirrose) ou como resultado da formação excessiva de bilirrubina (icterícia hemolítica).
Procedimentos, Materiais Necessários e Resultados do Teste de Ehrlich
Para realizar o teste de Ehrlich, você vai tem que preparar o reagente de Ehrlich dissolvendo cerca de 0,5 a 2,0 gramas de p-dimetilaminobenzaldeído (DMAB) em 50 ml de etanol a 95%, e 50 ml de H2SO4 a 10% são adicionados. Em seguida, você precisara de uma amostra de proteína, ácido clorídrico (HCl) concentrado, e Nitrito de sódio (NaNO2)
Já na parte de materiais será necessário tubos de ensaio, suporte de tubos de ensaio e pipetas. Para iniciar o procedimento do teste de Ehrlich, pegue uma amostra de cerca de 3-4 ml de uma solução de proteína diluída (ou urina) e adicione a um tubo de ensaio.
Em seguida, esse líquido é então fervido com 1 ml de HCl concentrado, e depois disso, se adiciona algumas gotas do reagente de Ehrlich (p-dimetilamino benzaldeído em H2SO4) ao tubo de ensaio.
Depois, o tubo de ensaio é então agitado para misturar o conteúdo corretamente. Agora no final do teste, a mudança de cor do tubo de ensaio é observada, sendo que se a cor do tubo de ensaio for uma cor azul-violeta, algumas gotas de uma solução de NaNO2 devem ser adicionadas ao tubo de ensaio para se obter uma cor azul.
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| Resultados do Teste de Ehrlich |
• Resultado negativo: Um resultado negativo no teste de Ehrlich é indicado pela ausência de cor azul-violeta na adição do reagente de Ehrlich. Isso indica que a amostra não contém nenhum triptofano.
• Resultado positivo: Um resultado positivo no teste de Ehrlich é indicado pelo aparecimento de cor vermelha a roxa ou azul-violeta. A cor então muda para azul com a adição de NaNO2. Isso indica que a amostra contém triptofano.
•Alta concentração de urobilinogênio: O urobilinogênio incolor reage com o reagente de Ehrlich em meio ácido para formar um produto de condensação rosa-avermelhado, que indica uma alta concentração de urobilinogênio na urina.
Limitações do Teste de Ehrlich
•Uma reação de falso-negativo pode ocorrer na presença de infecção do trato urinário, pois os nitritos oxidam o urobilinogênio em urobilina.
• Um resultado falso negativo pode ocorrer durante alguma terapia com antibiótico, pois algumas bactérias intestinais que produzem urobilinogênio podem ser destruídas.
• O teste de Ehrlich é um teste específico para aldeído ou triptofano e não detecta outros aminoácidos ou proteínas.
Referências
- https://www.nobelprize.org/prizes/medicine/1908/ehrlich/biographical/ (acessado em 13/07/2021 as 19:48)
- https://microbenotes.com/ehrlich-test/ (acessado em 13/07/2021 as 20:05)
- https://www.chemistrylearner.com/ehrlich-reagent.html (acessado em 13/07/2021 as 20:18)
Sobre o autor
Olá meu nome é Pedro Coelho, eu sou engenheiro químico, engenheiro de segurança do trabalho e Green Belt em Lean
Six Sigma. Além disso, também sou estudante de engenharia civil, e em parte de minhas horas vagas me dedico a escrever artigos aqui no ENGQUIMICASANTOSSP, para ajudar estudantes de Engenharia Química e de áreas correlatas. Se você está curtindo essa postagem, siga-nos através de nossas paginas nas redes sociais e compartilhe com seus amigos para eles curtirem também :)
0 Comentários de "Reagente de Ehrlich: Definição, Usos em Testes, e Resultados"
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