Reagente de Molisch – Teste para indicar a presença de Carboidratos

POR Pedro Coelho

Publicado: quinta-feira, 2 de janeiro de 2020

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Desenvolvido pelo checo-austríaco Dr. Hans Molisch por volta dos anos de 1880, o Reagente de Molisch é uma solução de alfa-naftol (Fórmula Química: C₁₀H₈O) em etanol a 95%, que é usado em testes químicos sensíveis para detectar a presença de carboidratos.

Este teste é bem útil para identificar qualquer composto que possa ser desidratado em furfural ou hidroximetilfurfural na presença de ácido sulfúrico concentrado (H₂SO₄) ou ácido clorídrico concentrado (HCl).

Foto do Dr. Hans Molisch em seu laboratório

Princípio do Teste de Molisch

O Teste de Molisch é um teste geral para todos os carboidratos. Neste teste, os carboidratos quando reagem com ácido sulfúrico concentrado (ou ácido clorídrico concentrado) são desidratados para formar furfural e seus derivados.

Nessas reações, o grupo ^-OH do açúcar é removido na forma de água e o furfural é formado (reação de topo) a partir de açúcar pentose e o 5-hidroximetilfurfural é formado (reação de fundo) a partir do açúcar hexose; Sendo furfural derivado da desidratação de pentoses e pentosanas, enquanto o hidroximetilfurfural é produzido a partir de hexoses e hexosanas. Os oligossacarídeos e polissacarídeos são hidrolisados para produzir seus monômeros repetidos pelo ácido.

Após a etapa de desidratação, os furfurais reagem com o Reagente de Molisch para produzir um produto de cor púrpura (vermelho violeta).

Reagentes e o Procedimento para realizar o Teste de Molisch em laboratório

Para realizar um Teste de Molisch experimental em laboratório, você precisa basicamente de:

• Solução de teste: 5% de glicose, 5% de sacarose, 5% de amido;
• Reagente de Molisch (5% de naftol em etanol);
• H₂SO₄ concentrado ou HCL concentrado;
• Tubos de ensaio secos;
• Pipetas.

Depois de adquirir os componentes, você pega 2 tubos de ensaio seco e coloca em um deles 2 ml da solução de teste, e no outro você coloca 2 ml de água destilada; coloque os tubos próximos para poder fazer o controle da reação e repare a mudança de cor durante o teste.

Após ter feito isso, adicione 2-3 gotas do Reagente de Molisch à solução de teste e logo após isso incline o tubo e pipete suavemente – entre 1 a 3 ml – ácido sulfúrico concentrado na lateral do tubo de teste para formar duas camadas distintas. 

Se o teste der positivo você vai ver a mudança de cor na junção das duas camadas e a formação de um produto de cor púrpura na interface destas, indicando a presença de carboidratos.

Um teste negativo (esquerda) e um teste positivo (direita)

O teste funciona em todos os tipos de carboidratos, sendo que os monossacarídeos dão um teste positivo rápido; os dissacarídeos e os polissacarídeos reagem de uma forma mais lenta.

Além disso, esse teste também detecta outros compostos além dos carboidratos (ou seja, glicoproteínas). Um resultado negativo indica a ausência de carboidratos e, se ocorrer o aparecimento de uma cor verde, desconsidere o teste.

Referências

• An Introduction to Practical Biotechnology, S. Harisha, Firewall Media, 2005
• https://www.onlinebiologynotes.com/molischs-test-objectives-principle-reagents-procedure-and-result/ (acessado em 17/09/2019 às 19:18)
• http://dept.harpercollege.edu/chemistry/chm/100/dgodambe/thedisk/carbo/molisch/molisch.htm (acessado em 17/09/2019 às 19:32)
• https://pt.slideshare.net/namarta28/qualitative-tests-for-carbohydrates-35884145 (acessado em 17/09/2019 às 19:59)
• https://commons.wikimedia.org/wiki/File:Hans_Molisch_(1856%E2%80%931937)_%C2%A9_Friedrich_Schiller_(1850%E2%80%931928).jpg (acessado em 17/09/2019 às 20:32)

Sobre o autor

Olá meu nome é Pedro Coelho, eu sou engenheiro químico, engenheiro de segurança do trabalho e Green Belt em Lean Six Sigma. Além disso, também sou técnico em informática, e em parte de minhas horas vagas me dedico a escrever artigos aqui no ENGQUIMICASANTOSSP, para ajudar estudantes de Engenharia Química e outros cursos. Se você acha legal esse projeto, siga-nos através de nossas paginas nas redes sociais e ajude-nos a divulgar essa ideia, compartilhando com seus amigos as nossas postagens.